一、试验原理:用于真菌的分离检测。脑心浸粉、胰酪蛋白胨和蛋白胨为培养基提供必要的氮源,同时含有维生素和矿物质;葡萄糖作为碳源支持微生物的生长;氯化钠维持培养基的渗透压平衡;磷酸氢二钠发挥缓冲作用;琼脂则是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
脑心浸粉 100g
胰酪蛋白胨 25g
蛋白胨 70g
葡萄糖 210g
氯化钠 25g
磷酸氢二钠 125g
琼脂 150g
pH 7.0 ± 0.2
培养温度 25℃
三、试验方法:
1. 称取590g培养基成分,加热搅拌使其完全溶解于1000ml蒸馏水中,随后在121℃下高压灭菌15分钟,备用。
2. 制备好的平板应保存在2-8℃的环境中,避免直接光照。干燥的培养基应存放在阴暗干燥处,并在室温下保存。
3. 使用前,将准备好的平板置于室温下静置10-20分钟。
4. 制备质控菌液。
5. 从质控菌液中选择适当稀释度的1ml,均匀涂布于平板上,每个稀释度接种两个平板。
6. 在23-28℃条件下倒置培养基,培养48-72小时,记录实验结果。
四、结果观察与解释:
接种以下质控菌株,在23-28℃条件下倒置培养基培养48-72小时,结果如下:
质控菌株菌株编号接种量(CFU) 参比或计数培养基方法质控评定标准其他特征
白色念珠菌 CMCC(F)9800 110-100 沙氏葡萄糖琼脂定量 PR≥0.7 白色菌落
黑曲霉菌 CMCC(F)9800 310-100 PR≥0.7 有黑色孢子
酵母菌 CMCC(F)9800 210-100 PR≥0.7 白色菌落
注:为增强培养基的选择性,每升培养基可加入0.05g氯霉素和0.5g放线菌酮。
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