第一章:实时荧光定量PCR概述
一、实时荧光定量PCR的概念
实时荧光定量PCR,即Real-time PCR,是一种利用荧光信号实时监测PCR反应全过程的方法。通过CT值和标准曲线,能够对未知模板进行准确的定量分析。
二、实时荧光定量PCR的原理
A. 化学原理
在此过程中,DNA产物会转化为荧光信号,通过测定荧光强度可以反映出所产生的DNA分子量。
B. 数学原理
通过循环数“n”(即CT值),可以有效计算样本中初始DNA的数量。
三、实时荧光定量PCR方法的选择
根据实验需求和样品类型,选择合适的实时荧光定量PCR方法,确保获得准确可靠的实验结果。
四、实时荧光定量PCR的优势
相比其他基因定量分析方法,实时荧光定量PCR具有以下优点:
- 可以实时监测PCR反应的进度,提高实验的精确性;
- 具备更广泛的检测范围,能够准确测定样本中的起始DNA量;
- 在单一管中同时完成扩增与检测,无需繁琐的后处理步骤。
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