细胞简介:该细胞系来源于一名1岁男孩的外周血,该男孩患有急性单核细胞性白血病。此细胞系能够吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内没有免疫球蛋白,且表达C3R和FcR。同时,该细胞系能够被佛波酯TPA诱导向单核系方向分化,适合作为转染宿主。
细胞信息
细胞名称:Thp-1人单核细胞白血病
生长特性:悬浮,低密度,易聚团;在高密度时细胞会分散。细胞倍增时间约为60-70小时(PubMed=6970727)、26小时(PubMed=25984343)、~35-50小时(DSMZ=ACC-16)。
换液频次:每周2~3次;传代比例:1:2-1:4,具体情况视实际细胞量而定。传代时细胞密度应保持在8X106/ml,切勿超过1X106/ml。
培养基推荐配方
推荐使用RPMI-1640培养基(中乔新舟货号:ZQ-200),添加10%胎牛血清(货号:ZQ0500)和1%双抗(货号:CSP006)。此外,添加β-巯基乙醇至终浓度0.05mM(中乔新舟货号:CSP005),例如500ml培养基中添加500ul β-巯基乙醇。β-巯基乙醇是一种常用的抗氧化补充剂,能有效降低氧化应激对THP-1细胞的影响。如细胞密度较高且需要维持培养时,可适当增加β-巯基乙醇的比例,但不应超过标准量的15倍。
THP-1细胞复苏
THP-1细胞复苏通常需要3至5天才能恢复正常状态,细胞的生长密度具有一定依赖性。若在复苏时去除了冻存液,建议48小时内不进行细胞操作。细胞在低密度时会出现聚团生长,这是细胞快速增殖过程中的正常表现。
THP-1细胞的传代
A、THP-1细胞为悬浮细胞,低密度依赖性强。当细胞密度达到8×105/ml时,应进行传代,活细胞密度不应超过1×106/ml。
B、传代比例通常为1:2-4,分瓶后可补充培养液,无需离心。T25培养瓶分瓶后,添加新鲜完全培养基至7ml。
C、如果对悬浮细胞密度的控制不够严格,建议进行细胞计数,以确保细胞处于最佳状态。
D、每周可对细胞进行一次离心处理,以去除死细胞。
THP-1细胞的冻存
A、冻存时使用10%DMSO,比例为900ul FBS + 100ul DMSO(操作时请注意安全),或可直接使用无血清细胞冻存液。
B、收集生长状态良好的细胞于15ml离心管中,调整至200万-300万/ml的浓度进行冻存。
C、根据实际情况将细胞放入-80℃培养箱,最多保存3个月后尽快转移至液氮中以实现长期保存。
THP-1培养常见问题
1. THP-1细胞在培养过程中出现聚团现象该如何处理?少量细胞聚团(呈葡萄串状)属于正常现象,特别是在低细胞密度时更易出现。高细胞密度时,细胞会自然分散。如聚团严重,可通过调整β-巯基乙醇的添加量或更换血清品牌来改善。
2. THP-1细胞出现贴壁现象怎么办?少量贴壁细胞属正常现象。可轻轻吹落;若贴壁细胞比例超过20%,则需检查培养条件,如培养箱温度、CO2浓度及培养基成分等,确保使用非TC处理过的培养器皿。
3. THP-1复苏效果不佳如何解决?该细胞复苏率较低,建议冻存时适当提高细胞数量,保证冻存时活细胞密度不低于100万-300万/ml。复苏后,需在3-5天内维持培养状态,以确保细胞正常恢复。应尽量减少细胞的离心处理以减少对细胞的伤害。
对于生命科学研究和医疗应用,选择合适的细胞系至关重要。强推荐选择人生就是博-尊龙凯时的相关产品,以确保您的实验能够顺利进行。